走近实验技术中的“四大发明”之Southern blot、Northern blot和Western blot-有驾

在生物学实验的领域中，Southern blot、Northern blot和Western blot被誉为实验技术中的“三大巨头”，它们各自担当着不同的检测任务，像家族的“三兄弟”一样各有千秋。那么，这“三兄弟”到底有何神通广大之处呢？且听我慢慢道来。

▲生物实验技术概览图（图片源自：公开网络资料）。

首先，我们要了解这“三兄弟”共同的基础——印迹实验，也被称为blot技术。这种技术通过特定的“印迹转移+标记检测”方式，将我们感兴趣的生物大分子“捉拿归案”。具体来说，就是将待检测的生物大分子通过电泳等方法分离后，转移到如硝酸纤维素膜（NC膜）等固相支持物上，然后用特定的识别物质（比如探针）去找到它们，最后通过显色反应让它们在膜上显露出踪迹。

其中，Southern blot作为“大哥”，是检测DNA的利器；Northern blot作为“二哥”，则专注于RNA的检测；而Western blot作为“小弟”，则是用来检测蛋白质的。至于那个不太常露面的Eastern blot，它是Western blot的一个变种，用于检测蛋白质上的特定修饰。

一、Southern Blot的探秘

Southern blot，或称为DNA印迹杂交，由英国生物学家Edwin Southern于1975年开创。它不仅可以检测样品中的DNA及其含量，还能分析DNA样品中是否存在与探针序列相匹配的DNA片段，甚至能验证这些片段的分子量大小。更厉害的是，它还能揭示基因的状态，比如是否有点突变、扩增重排等。

二、Northern Blot的奥秘

紧接着出场的是Northern blot，也就是RNA印迹杂交。这个技术是由James Alwine、David Kemp和George Stark于1977年共同发明的。与Southern blot不同的是，Northern blot处理的是RNA分子。它可以帮助我们通过检测RNA的表达水平来间接了解基因的表达情况。在这个过程中，RNA样品会经过变性分离，然后转移到固相载体上，与特定的探针进行杂交，最终通过显影观察RNA的大小和含量。

三、Western Blot的解密

最后要介绍的是Western blot，也就是蛋白质印迹杂交。这项技术主要用于检测和分析蛋白质的表达情况。WB的实验过程包括蛋白质的提取、定量、分离、转移和检测。通过特异性的抗体与固相膜上的蛋白质发生抗原-抗体免疫反应，我们可以了解样品中蛋白质的存在、大小和浓度。

现在你应该对这“三兄弟”有了更深入的了解了吧！它们虽然各自有着不同的检测对象和方法，但都是生物学研究中不可或缺的重要工具。